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Dentro del laboratorio

La ciencia detrás
de cada frasco.

Cultivo de tejidos no es magia — es química, biología celular y una cadena de decisiones reproducibles. Esta es la versión sin floritura.

Coord18.4655°N · 66.1057°W
Lab IDJEL-PR-001
StatusOPERATIONAL
Est.2025
01 · Estéril
Cadena estéril

Del campo al frasco
sin perder una colonia.

Si entra una sola bacteria al frasco, en 72 horas el medio es una sopa turbia. Cada paso de la cadena existe para que eso no pase.

  1. 01
    Recolección
    Explante sano

    Tejido meristemático o nodal — el más joven y limpio que la planta donante pueda dar.

  2. 02
    Esterilización
    Hipoclorito + surfactante

    Hipoclorito con surfactante en concentración ajustada por especie. Tiempo de inmersión variable según rigidez del tejido.

  3. 03
    Cabina laminar
    Aire HEPA filtrado

    Flujo laminar con aire HEPA filtrado. Instrumental esterilizado por flama entre cada transferencia.

  4. 04
    Inoculación
    Medio basal MS

    Transferencia al frasco con medio nutritivo gelificado. Sello que permite intercambio gaseoso controlado.

  5. 05
    Cámara de cultivo
    Fotoperíodo controlado

    Temperatura, fotoperíodo, espectro e intensidad calibrados por etapa.

02 · Medios
Medios de cultivo

El medio decide
qué hace la planta.

MS basal de Murashige y Skoog, ajustes hormonales por etapa y un pH 5.8 que se siente trivial — hasta que mueve la respuesta del 10 al 85%.

Mismo MS, distinta etapa, distinta planta.

La sal basal Murashige & Skoog 1962 es la columna vertebral. Sobre ella montamos auxinas, citoquininas, vitaminas y azúcares en combinaciones específicas por etapa.

La proporción auxina/citoquinina decide si la célula crece como brote, como raíz, o como callo desorganizado. Lo que ves al lado es la receta base con la que arrancamos casi todos los protocolos.

  • Ajustamos por especie usando titulación dose-response
  • Documentamos cada lote con número de batch y pH medido
  • Esterilización final por autoclave / olla de presión
Medio
MS basal · vitaminas Gamborg
pH
Ligero ácido
BAP
Elevada
Kinetina
Baja
Sacarosa
Estándar

Citoquininas elevadas para inducir brotación múltiple. Subcultivos periódicos.

03 · Etapas
Las 5 etapas

De explante a planta
en cinco saltos.

Cada etapa tiene sus condiciones, sus indicadores de éxito y sus formas particulares de fallar. La micropropagación seria empieza con saber diagnosticar.

01Etapa

Establecimiento

El explante entra al sistema. Esterilización, evaluación de oxidación y respuesta inicial al medio.

Medio
MS + citoquinina baja
Luz
Fotoperíodo controlado
Tiempo
10–21 días
Riesgos

Contaminación bacteriana / fúngica · oxidación fenólica

02Etapa

Multiplicación

Activación de meristemos axilares. El tejido pasa de 1 brote a 5–30 en cada subcultivo.

Medio
MS + citoquinina elevada
Subcultivo
Periódico
Ratio
×3 a ×10 por ciclo
Riesgos

Hiperhidricidad · variación somaclonal · callo no deseado

03Etapa

Enraizamiento

El brote se separa y se transfiere a medio sin citoquininas, con auxina suave. Aparece el sistema radicular funcional.

Medio
½ MS + auxina suave
Carbón act.
Dosificado
Tiempo
14–28 días
Riesgos

Raíz vidriosa · ausencia de raíces secundarias

04Etapa

Aclimatación

El plantín sale del frasco a sustrato sólido. La humedad baja gradualmente; los estomas aprenden a regularse.

Sustrato
Calibrado por especie
Humedad
Rampa controlada
Tiempo
10–14 días
Riesgos

Colapso por choque hídrico · quemadura por luz directa

05Etapa

Endurecimiento

Transición final a condiciones de invernadero. La planta gana cera cuticular y se vuelve comercialmente viable.

Luz
100% ambiente
Riego
rutina normal
Tiempo
21–45 días
Riesgos

Plagas (trips, ácaros) · deficiencias nutricionales

04 · Aclim.
Aclimatación

La curva que salva el lote.

Las plantas in vitro tienen estomas perezosos y casi nada de cera cuticular. Sacarlas al ambiente sin transición las mata en horas.

La rampa de la derecha es nuestra línea media para tropicales tipo Philodendron. Cambia por especie, pero la forma general no.

Aclimatación · 14 días

humedad relativa

Rampa de humedad recomendada. La transición agresiva colapsa estomas; la lenta invita patógenos. Esta es la línea media de nuestros lotes.

60%70%80%90%100%d0d2d4d6d8d10d12d14FrascoCampanaMesaAmbiente
05 · Siguiente paso
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